ATCC菌種保藏的重要意義就在于盡可能保持其原有性狀和活力的穩(wěn)定,確保菌種不死亡、不變異、不被污染,以達(dá)到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。ATCC菌種保藏的方法有哪些呢?
傳代保存法
有些微生物當(dāng)遇到冷凍或干燥等處理時(shí),會(huì)很快死亡,因此在這種情況下,只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)就是要定期地進(jìn)行菌種轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存,它是zui基本的微生物保存法,例如酸奶等常用生產(chǎn)ATCC菌種的保存。
傳代保存時(shí),培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于zui適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸ATCC菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
一般地,大多數(shù)菌種的保藏溫度以5℃為好,像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物ATCC菌種則可以使用37℃進(jìn)行保存,而蕈類等大型食用菌的菌種則可以室溫直接保存。
傳代培養(yǎng)保存法雖然簡(jiǎn)便,但其缺點(diǎn)也很明顯,如:①ATCC菌種管棉塞經(jīng)常容易發(fā)霉;②菌株的遺傳性狀容易發(fā)生變異;③反復(fù)傳代時(shí),菌株的病原性、形成生理活性物質(zhì)的能力以及形成孢子的能力等均有降低;④需要定期轉(zhuǎn)種,工作量大;⑤雜菌的污染機(jī)會(huì)較多。
液體石蠟覆蓋保存法
該法較前一種方法保存ATCC菌種的時(shí)間更長(zhǎng),適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。此法可防止干燥,并通過限制氧的供給而達(dá)到削弱微生物代謝作用的目的。其具有方法簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn),同時(shí)也適用于不宜冷凍干燥的微生物(如產(chǎn)孢能力低的絲狀菌)的保存,而某些細(xì)菌如固氮菌、乳酸桿菌、明串珠菌、分枝桿菌、紅螺菌及沙門氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克銀漢霉、毛霉、根霉等不宜采用此法進(jìn)行ATCC菌種保藏。